En estudios anteriores se ha demostrado que la mirada mutua entre perros y humanos, pero no entre lobos y humanos, desencadena una liberación de oxitocina en ambas especies. Esto sugiere que el comportamiento de contacto visual, que está regulado por una base endocrina comparable al vínculo entre madre e hijo en humanos, desempeña un papel importante en el apego entre perros y humanos.

El color de los ojos tanto de los perros como de los lobos está determinado principalmente por el iris, porque la mayor parte de la esclerótica no está expuesta externamente y sus pupilas suelen ser oscuras. Sobre este aspecto, investigadores japoneses realizaron un análisis comparativo de imágenes sobre el color de ojos de lobos y perros, como así también, el efecto del color de los ojos de los perros en la percepción humana.

El estudio, recientemente publicado en Royal Society Open Science, se basó en la morfología ocular del animal domesticado más antiguo del mundo, el perro (Canis familiaris), y el de sus parientes más cercanos, el lobo (Canis lupus). 

Los investigadores concluyeron que "el color del iris de los perros es más oscuro que el de los lobos, y que los ojos oscuros de los perros afectan positivamente la percepción humana hacia los perros". También que "la apariencia de ojos más oscuros en los perros modernos está asociada con los siguientes escenarios evolutivos: (i) los lobos han desarrollado una apariencia de ojos externos (es decir, iris más claro) que es adaptativa bajo selección natural (por ejemplo, comunicación conespecífica, fotoprotección o una combinación de estos), (ii) como los perros ancestrales vivían con los humanos, sus presiones de selección natural se han relajado, (iii) la selección artificial por preferencia humana ha moldeado algunos rasgos en los perros, y (iv) los perros modernos han desarrollado una apariencia ocular externa (es decir, iris más oscuro) que permite que los humanos los perciban como amigables e inmaduros". 

Por último, señala que "en general, los perros con ojos oscuros pueden haber desarrollado este rasgo en gran medida como un medio para enviar señales de mirada no amenazantes a los humanos".